Клетка печени кролика

Ответ

Клетка печени содержит 48 хромосом = 2n2c = 48n48c.

Перед первым редукционным делением мейоза в интерфазе в S-периоде происходит репликация ДНК и хромосомный набор становится равен 2n4c = 48n96c. В телофазе мейоза 1 образуются две гаплоидных клетки с набором 1n2c = 24n48c.

Перед последним эквационным делением репликации не происходит, и в телофазе мейоза 2 хромосомный набор равен 1n1c = 24n24c

Печень — самая крупная железа организма. Функции печени разнообразны, она вырабатывает желчь, которая эмульгирует жиры, омыляет жирные кислоты, усиливает действие ферментов поджелудочной железы. Печень выполняет барьерную функцию, обезвреживая экзогенные и эндогенные токсины. В ней депонируются витамины, углеводы, кровь, синтезируют важнейшие белки плазмы крови, фосфопротеины. В общей сложности, печень в организме выполняет более 500 функций [2, 6].

Поскольку печень обладает множеством функций, ее функциональные расстройства крайне разнообразны. При болезнях печени повышается нагрузка на орган и может повреждаться его структура. У животных большой удельный вес занимает поражение печени — преимущественно дегенеративные изменения паренхимы. Это связано с тем, что организм животных часто подвергается экзогенным и эндогенным интоксикациям вследствие нарушения условий кормления и содержания, особенно в периоды максимального напряжения всех функций животного[1, 2, 3, 5].

Цель исследования. Изучить морфофункциональное состояние печени кроликов при использовании органического селена (Сел-Плекс) в составе гранулированного комбикорма в условиях Северного Зауралья.

Материал и методы исследования

Исследования проводились на базе кролиководческого комплекса ЗАО «Рощинский» Тюменского района Тюменской области, а также в условиях кафедры анатомии и физиологии Тюменской ГСХА. При постановке научно-хозяйственного опыта были отобраны кролики в возрасте 2 месяцев калифорнийской породы. Формирование групп проводилось по принципу параналогов с учетом возраста, происхождения, живой массы, и состояния здоровья.

С целью изучения морфологического состояния печени кролика под действием Сел-Плекса проводили гистологические исследования по общепринятой методике [4]. Изучение гистопрепаратов проводилось при помощи световых микроскопов МБИ — при объективе 10, 40 и микроскопа Meigi 484001-10, окуляр 10, объективы 10 и 40.

Результаты исследования и их обсуждение

При топографическом исследовании печени опытных и контрольных групп кроликов смещение органов не выявлено.

В объеме печень не увеличена, края острые, с поверхности имели гадкий вид равномерно окрашенные в светло-красный цвет с незначительным розовым оттенком, упругой консистенции, на разрезе дольчатое строение четко выражено.

При гистологическом исследовании печени кроликов опытной группы с применением кормовой добавки Сел-Плекс характерных изменений в тканях и клетках печени не обнаружены, что касается контрольной группы, были выявлены следующие изменения:

Рис. 1. Токсическая дистрофия, с дегенеративным ожирением гепатоцитов. Окраска гематоксилином и эозином. х40

Рис. 2. Гибель ядер гепатоцитов печени на стадии митоза у кроликов контрольной группы. Окраска гематоксилином и эозином. х40

Рис. 3. Смешанная жировая дистрофия гепатоцитов печени у кроликов контрольной группы. Окраска гематоксилином и эозином. х40

Рис. 4. Лизис ядер на стадии митоза клеток печени у кроликов контрольной группы. Окраска гематоксилином и эозином. х40

Рис. 5. Микронекротические очаги в печеночной дольке у кроликов контрольной группы. Окраска гематоксилином и эозином. х 20

Рис. 6. Очаговая пролиферация соединительной ткани в триаде печени у кроликов контрольной группы. Окраска гематоксилином и эозином. х40

Полученные данные свидетельствуют о токсическом поражении печени (жировой гепатоз).

Патогенез жировой инфильтрации и дегенерации печени в настоящее время в той или иной мере в литературе освещены. Известно, что недостаток в рационе углеводов ведет к переходу из жирового депо организма жира, который заполняет печеночные клетки, а затем постепенно распадается. При токсическом повреждении печени отмечается распад сложных липопротеидных комплексов мембран гепатоцитов, освобождением липидов и отложением их в цитоплазме гепатоцитов, ядра клетки при этом не перемещается, как при жировой инфильтрации, они подвергаются деформации и лизису.

Таким образом при гистологическом исследовании тканей печени кроликов опытной группы мы не выявили структурных изменений, что нельзя сказать о контрольной группе, у которой выявлена зернистая и жировая дистрофия гепатоцитов, очаговая пролиферация соединительной тканей печени, микронекротические очаги в печеночной дольках.

Физиологическая роль печени важна и многогранна, это основной орган обмена веществ. Повреждение клеток печени приводит к различным нарушениям ее функций. Проведенные исследования дают основание заключить, что введение Сел-Плекс (200 г/т) положительно влияет на морфофизиологическое состояние печени, что проявляется выраженным дольчатым строением, сохранностью паренхиматозных структур печени.

Число случаев сепсиса неуклонно растет, в том числе и в странах с высокоразвитой медициной [6]. Из-за гипотетического толкования множества вопросов по проблеме сепсиса дальнейшее его изучение в клинике и эксперименте и по сегодняшний день не теряет своей актуальности: не существует общепринятого понятия сепсиса, единой классификации и т.д. За последние годы была разработана и представлена новая классификация и диагностические критерии сепсиса [10]. Данная классификация определяет следующие клинические категории: cиндром системной воспалительной реакции, сепсис, тяжелый сепсис, сепсис с полиорганной недостаточностью, септический шок; подчеркивается, что степень тяжести дисфункции орган является важным определяющим фактором прогноза сепсиса. Отмечается, что характер, патогенность и продолжительность воздействия микробного фактора во многом определяет выраженность полиорганной дисфункции [3]. В развитии септической реакции и полиорганной недостаточности принципиальная роль отводиться недостаточности печени [7], общеизвестно об активном участии звездчатых макрофагов печени (звездчатые макрофаги печени – так называемые клетки Купфера – кК) в защите организма от токсических веществ и инфекции [8]. На сегодняшний день в большинстве случаев сепсис вызван грамположительной микрофлорой; однако, патогенез сепсиса, вызванного грампозитивной флорой, до настоящего времени изучен значительно меньше. В общей сумме возбудителей сепсиса возрастает доля коагулазонегативных («эпидермальных») стафилококов, метициллинорезистентных штаммов золотистого стафилококка и энтерококков, возрастает также удельный вес сепсиса смешанной этиологии. Несмотря на огромное количество литературных данных, до настоящего времени морфологический субстрат полиорганной недостаточности – одной из ведущей причины высокой летальности, – в динамике сепсиса различной этиологии изучен недостаточно. В настоящей работе мы представляем некоторые результаты нашего опыта работы в этой области.

Читайте так же:  Клетки для кроликов в 3 яруса

Цель исследования

Целью настоящей работы явилось гистологические и количественное исследование патоморфологических изменений печени в динамике экспериментального стафилококкового сепсиса с учетом его этиологической структуры.

Материалы и методы исследования

Эксперименты были проведены на 20 половозрелых кроликах обоего пола породы «Шиншилла». Им предварительно внутривенно вводили стафилококковый токсин 0,06 мл (Lh – 0,08) и через 48 часов кроликам из первой серии экспериментов внутрибрюшинно – 30-миллиардную взвесь 24-часовой культуры золотистого стафилококка штамма № 4293 из крови септического больного, а кроликам из второй серии экспериментов помимо вышеотмеченного штамма в том же количестве также внутрибрюшинно вводили и 80 миллиардную взвесь культуры эпидермального стафилококка штамма № 3347 [2, 4]. Контролем служили интактные животные (3 кролика). Здесь мы представляем данные исследования печени тех кроликов, которые перенесли бактериальную интоксикацию и были выведены из эксперимента на 9-е, 10-е и 14-е сутки после введения микробной культуры. Были использованы гистологические и морфометрические методы исследования. Для морфометрической оценки печени был использован метод «Визуальной классификации под статистическим контролем» [1]. На препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином, мы оценивали классы гепатоцитов (при увеличении 90X10), а также классы клеток Купфера (при увеличении 40×10). Было выделено 5 классов гепатоцитов, различаемых визуально (гепатоцит с нормальным строением, гепатоциты в стадии зернистой, вакуольной дистрофии и некроза, а также – двуядерный, гипертрофированный гепатоцит) и 3 классов клеток Купфера (кК с нормальным строением, гипертрофированные и дистрофически-некротически измененные звездчатые макрофаги). Вычислялись средние доли каждого класса и их доверительные интервалы в процентах. На срезах печени, окрашенных гематоксилин-эозином (при увеличении 20X10), методом точечного счета измерялись средние доли гепатоцитов и синусоидов и их доверительные интервалы в процентах. Применялась окулярная вставка «ВК-4». При статистическом анализе использовали компьютерный пакет программ «Биостатистика». Исследование проводилось согласно локальным правилам по содержанию и использованию лабораторных животных.

Результаты исследования и их обсуждение

В наших экспериментах в печени был отмечен тромбогеморрагический синдром: центральные вены и синусоиды печени расширены, кровенаполнены, наблюдается агрегация эритроцитов в их просветах, вокруг портального поля – отек и разрыхление соединительной ткани; синусоиды расширены настолько, что наблюдается атрофия печеночных балок (рис. 1, А, Б).

Рис. 1. Гистоструктура печени кроликов из I серии экспериментов. (А – 9-е сутки после введения микробной культуры) расширение и кровенаполнение центральных вен и синусоидов печени, агрегация эритроцитов в их просветах, атрофия печеночных балок. (Б – 10-е сутки после введения микробной культуры ) Отек и разрыхление соединительной ткани вокруг портального поля, агрегация эритроцитов в просвете междолькового сосуда печени. Парафиновые срезы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение: А, Б – x200

С удлинением срока сепсиса статистически достоверно уменьшается средняя доля гепатоцитов, а средняя доля синусоидов возрастает (рис. 2).

Рис. 2. Средние доли гепатоцитов (А) (%) и синусоидов (Б) (%) в контроле (1), на 9-е (2), 10-е (3) и 14-е (4) сутки после введения микробной культуры (первая серия экспериментов)

Примечательно, что в основе современных методов комплексного лечения сепсиса лежит новое понимание сложного патогенеза данной болезни, в соответствии с которым гомеостаз организма нарушается неконтролируемым каскадом воспаления, коагуляции и фибринолиза, что приводит к тромбозам микрососудов, недостаточности органов и смерти больного; тромботическая микроангиопатия считается важным патофизиологическим звеном данного заболевания [9]. В наших предыдущих работах [5 и др.] при использовании дополнительно одного из таких методов – плазмафереза, – было зафиксировано статистически достоверное уменьшение показателя недостаточности органов и систем на 18,6%. Согласно результатам настоящей работы, тромбогеморрагический синдром охватывал не только кровь, но и ткани сосудистых стенок и паренхимы печени; тромбогеморрагические изменения имели тенденцию к нарастанию с удлинением продолжительности сепсиса.

Читайте так же:  С чего начать при разведении кроликов

Микроциркуляторные нарушения приводят к развитию нарастающих дистрофически-некротических изменении гепатоцитов и синусоидальных клеток печени; клетки Купфера набухшие, местами наблюдается их гиперплазия, а также других синусоидальных клеток, инфильтрация кК, местами они десквамированы (рис. 3, А). Выявляются участки обширных некрозов гепатоцитов; в таких местах структура печени фактически стерта, отмечались обширные кровоизлияния (рис. 3, Б). С удлинением продолжительности сепсиса статистически достоверно возрастает средняя доля дистрофически-некротически измененных гепатоцитов и уменьшается средняя доля гепатоцитов с нормальным строением (рис. 4). Мы разделяем мнение о значении продолжительности воздействия микробного фактора в развитии полиорганной дисфункции [3].

Рис. 3. Гистоструктура печени кроликов из II серии экспериментов. (А – 10- е сутки после введения микробной культуры) Набухшие кК, гиперплазия кК и других синусоидальных клеток; инфильтрация кК, местами они десквамированы. (Б – 14-е сутки после введения микробной культуры) обширные некрозы гепатоцитов; обширные кровоизлияния , структура печени фактически стерта. Парафиновые срезы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение: А, Б – x400

Рис. 4. Средние доли морфологических классов гепатоцитов (%) в контроле (А), на 9-е (Б), 10-е (В) и 14-е (Г) сутки после введения микробной культуры; гепатоцит с нормальным строением (1), гепатоциты в стадии зернистой (2), вакуольной (3) дистрофии и некроза (4), гипертрофированные гепатоциты (5) (первая серия экспериментов)

Рис. 5. Средние доли морфологических классов кК (%) в контроле (А), в первой (Б) и во второй (В) сериях экспериментов; 1 – кК с нормальным строением, 2 – гипертрофированные кК, 3 – дистрофически-некротически измененные кК (10-е сутки после введения микробной культуры)

Ряд авторов указывают на значение реактивности макрорганизма при сепсисе [2]; в действительности, на нашем материале, при гистологическом исследовании отмечались незначительные индивидуальные колебания, которые не выходили за пределами морфологической картины соответствующего срока выведения животных из эксперимента после введения микробной культуры. Однако, количественные параметры печени при сепсисе, вызванного только золотистым стафилококком и при сепсисе, вызванного совместным заражением кроликов золотистым и эпидермальным стафилококками, не отличались друг от друга статистически достоверно ни на 9-е, ни на 10-е и ни на 14-е сутки после введения микробной культуры (рис. 5).

Заключение

Количественные параметры печени при сепсисе, вызванного только золотистым стафилококком и при сепсисе, вызванного совместным заражением кроликов золотистым и эпидермальным стафилококками, не отличались друг от друга статистически достоверно ни на 9-е, ни на 10-е и ни на 14-е сутки после введения микробной культуры; при гистологическом исследовании отмечались незначительные индивидуальные колебания, которые не выходили за пределами морфологической картины соответствующего срока выведения животных из эксперимента после введения микробной культуры.

При экспериментальном стафилококковом сепсисе различной этиологии в печени были выявлены однотипные изменения; в первую очередь, нарастающие с удлинением продолжительности сепсиса микроциркуляторные нарушения, которые приводят к развитию также нарастающих дистрофически-некротических изменении гепатоцитов и синусоидальных клеток печени.

Препарат № 75. Купферовские клетки. Печень кролика. Инъекция красителя в организм (рис. 74)

Изучение этого препарата дает возможность познакомиться с одной из функций гистиоцитов и макрофагов — способностью быстро накоплять в своей протоплазме различные коллоидные вещества, в частности коллоидные красители.

В ушную вену кролика инъецируют 2 мл трипанового синего. Через 2-3 часа кролика убивают и фиксируют кусочек печени смесью «суза». Срезы докрашивают квасцовым кармином. Препарат следует рассматривать при большом увеличении микроскопа. Паренхима печени млекопитающих состоит из радиально расположенных анастомозирующих клеточных тяжей, так называемых печеночных балок. Протоплазма печеночной клетки на препарате окрашена в слабо розовый цвет, ядра — в красный. Клетки имеют полигональную форму. Их легко узнать по большим правильным округлым Рис. 74. Купферовские клетки печени ядрам с небольшим количеством зерен хроматина и одним или двумя ядрышками.


Рис. 74. Купферовские клетки печени кролика (увеличение — ок. 7, иммерсия):

1 — куцферовские клетки, 2-ядро купферовской клетки, 3-зерна трипанового синего, 4-печеночные клетки

Между печеночными балками проходит большое количество кровеносных капилляров; стенки их выстланы эндотелиальными клетками, которые в капиллярах печени имеют своеобразное строение и функцию: они способны к фагоцитозу и к накоплению в своей цитоплазме электроотрицательных коллоидов. Это — так называемые купферовские клетки. Они имеют вытянутую форму с большим количеством отростков, которые сливаются друг с другом. По существу эндотелиальная выстилка ^капилляра печени представляет собой сплошной синцитий. Ядра купферовских клеток имеют овальную или вытянутую форму, они значительно меньше

Читайте так же:  Какой наполнитель лучше для кролика

ядер печеночных клеток и содержат большее количество хроматина; поэтому на препарате они окрашиваются интенсивнее.

Протоплазма купферовских клеток заполнена синими зернами красителя, который проникает в клетку из крови и накапливается в ней.

Краситель был введен в организм животного при его жизни и тогда же поглощен клетками. Поглощение красителя из крови можно рассматривать, как модель процесса очищения крови купферовскими клетками от посторонних и вредных веществ.

Купферовские клетки способны также к фагоцитозу, т. е. поглощению твердых частиц (бактерий, эритроцитов и т. д.) и перевариванию их. Таким образом, эндотелий капилляров печени выполняет в организме защитную функцию, фагоцитируя бактерии и поглощая из крови различные посторонние и вредные вещества.

Решение завести кролика всегда должно сопровождаться выбором клетки. Если хозяева предполагают, что кролик должен свободно перемещаться по дому, а клетка — пустая трата денег, они ошибаются. Даже если кролик обучен, дрессирован и дисциплинирован, то клетка ему необходима в качестве укрытия. Какую же клетку выбрать, чтобы любимец чувствовал себя в безопасности и мог спокойно отдохнуть?

Размеры

Как и в любом случае с клетками, чем она больше, тем лучше. Если большую часть своей жизни кролик будет проводить в клетке, то ему необходимо самое просторное жилище, которое хозяева смогут себе позволить. Минимальные размеры клетки зависят от питомца — кроличье гнездо должно быть минимум в 4 раза больше его самого. Для маленьких кроликов (до 3,5 кг) подойдет клетка размером 90*60 см, для крупных размеры клетки чуть больше — 90*80 см.

Полы в клетке

Заводчики редко обращают внимание на полы в кроличьих клетках, или наоборот обращают, руководствуясь только своим удобством. Клетки с решеткой на полу и съемным поддоном совсем не подходят ушастым, поскольку любая, даже самая мелкая решетка может поранить лапы. Травмирование суставов и появление язв на лапках — явный признак неправильно подобранной клетки. Если выбор клеток ограничен, или кролика передали сразу вместе с домом, то решетчатые полы нужно застелить куском дерева, сверху на пол уложить травяной мат, чтобы питомец не скользил по клетке.

Вход в нору

Вход в клетку, тоже важный атрибут, он должна быть достаточно большой, чтобы кролик свободно проходил в нее самостоятельно. Если в клетке установлен лоток, то заранее продумайте, как вы будете доставать его оттуда. Это опять же достаточно большой вход или съемный верх.

Дверь в клетку должна быть безопасной, иметь пластиковые защитные полоски или просто сглаженные края. Лучше всего, если кролик самостоятельно сможет выходить и заходить в клетку, поэтому выбор клетки с боковой дверью наиболее удачный.

Подстилка

Если кролик не привык жевать все что не попадя в качестве постели для него можно использовать флисовое одеялко, кусочек ковра или полотенце. Если кролик не дрессирован, то подстилка из травы станет оптимальным вариантом. За рубежом используют подстилки из сизаля, но на отечественном рынке их практически не встретишь.

По-прежнему хорошим подстилочным материалом остаются сено или солома, а вот сосновая и кедровая стружка выделяют аромамасла, которые негативно сказываются на работе печени кроликов. Если и выбирать стружку в качестве подстилки, то предпочтительнее использовать осиновую.

Свежий воздух и клетка

Домашний кролик будет рад смене обстановке, если его выпустить на улицу, без клетки это сделать практически нереально. Если заводчик живет в частном доме, то у него есть возможность побаловать питомца. Для этих целей подходит клетка с обрешеткой со всех сторон.

Такое убежище можно просто поставить на землю и позволить питомцу полакомиться свежей травой. Но у такой прогулки есть и минусы: клетка не защитит ушастого друга от палящего солнца, ветра и других животных, которые могут навредить питомцу (кошек, собак, змей).

Подводим итоги

Чтобы завести кролика клетка нужна обязательно. Она должна быть просторной, безопасной, удобной и обеспечивать свободное перемещение кролика. Если вы выгуливаете кролика в клетке, то оставлять его на улице в одиночестве не стоит. Оптимальным вариантом станет приобретение двух клеток для улицы и дома, но если вы не собираетесь показывать кролику мир, то можно ограничится и одной.